Тя създава система за подготовка на средни и младши медицински кадри във Великобритания през 1855 г. и обучава медицински сестри по време на Кримската война. Найтингейл се смята за основоположник на съвременната професия на медицинската сестра. Пише и няколко книги, които по-късно са използвани като учебници по здравни грижи.

Флорънс Найтингейл дори пише клетва, подобна на Хипократовата, с която сестрите тържествено обещават да се грижи за пациентите, без комерсиални цели.